Medio de subclonación y expansión de células de hibridoma 杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Descripción del producto

产品名称

Nombre del producto

杂交瘤细胞扩培及亚克隆专用培养基

Medio de subclonación y expansión de células de hibridoma

货号 N.º cat.

BRS-MED02

规格

Especificación

500ml/瓶

500 ml/botella

产品组分

Componentes

DMEM基础培养基:80%(体积比)

Medio base DMEM: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Suero Fetal Bovino (FBS, importado): 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Medio condicionado: 10% (v/v)

Cantidad: 100 µ/mL

Penicilina: 100 U/mL

Contenido: 100 µ/mL

Estreptomicina: 100 U/mL

其它添加物:单细胞增殖因子及小分子添加剂

Otros aditivos: factores de proliferación uni-celular y suplementos de moléculas pequeñas

保存条件

Condiciones de almacenamiento

-20 grados 保存,有效期 18 个月.

Almacenar a -20 grados, vida útil 18 meses

使用方法

Instrucciones de uso

培养基融化:

37 grados 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

Duración: 3-5 min.

沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Descongelar el medio:

Descongele el medio en un baño de agua a 37 grados. Limpie la superficie exterior con etanol al 70% y colóquela en un gabinete de bioseguridad para su uso.
Nota: La aparición de una pequeña cantidad de material floculante blanco después de la descongelación es normal. Deje reposar el medio durante 3 a 5 minutos para que se asienten los flóculos y luego recoja el sobrenadante para su uso.

融合孔处理(状态良好细胞):

针对状态良好的融合孔(比如孔内培养基颜色正常或轻微发黄,且显微镜下细胞状态良好,透亮,大小正常等)可直接使用黄枪头轻轻吹打融合孔,细胞计数后按0.8-1.5cell/孔/200ul培养基铺板.

Manejo de Fusion Wells – Células sanas:

Para los pocillos de fusión con células en buenas condiciones (p. ej., color medio normal o ligeramente amarillo, las células bajo el microscopio parecen sanas, brillantes y de tamaño normal), pipetee suavemente hacia arriba y hacia abajo con una punta de pipeta amarilla. Cuente las células y la placa a 0,8–1,5 células/pocillo en 200 l de medio.

融合孔处理(状态欠佳细胞):

针对状态不太良好的融合孔(比如孔内培养基颜色酸化发黄或显微镜下细胞状态皱缩,发黑等)可选择2种方式进行后续亚克隆.

Manejo de pozos de fusión: celdas subóptimas:

Para los pocillos de fusión con células en condiciones subóptimas (p. ej., medio acidificado/amarillo o las células aparecen arrugadas y oscuras al microscopio), hay dos opciones disponibles para la subclonación posterior:

第一种方式是将融合孔细胞吸至装有1ml本培养基的24孔板内,在扩培后的第2-3日再行计数进行亚克隆铺板(0. 8-1,5 celdas/孔/200ul培养基),此时融合孔细胞倍增的次数有限且细胞状态良好,非常适于亚克隆铺板;

Opción 1: transfiera las células del pocillo de fusión a una placa de 24 pocillos que contenga 1 ml de este medio. Después de 2 a 3 días de expansión, cuente las células y realice la subclonación a 0,8–1,5 células/pocillo en 200 l de medio. En esta etapa, la duplicación celular es limitada, pero el estado celular es bueno, lo que la hace ideal para la subclonación.

第2种方式是使用黄枪头小心吸弃融合孔上清,每孔补充200ul新鲜的本培养基,至37度5% CO2, 3-4 unidades, 3-4 unidades, 0,8-1,5 células/unidad/200 ul;

Retire con cuidado el sobrenadante del pozo de fusión usando una punta de pipeta amarilla y agregue 200 l de medio fresco por pocillo. Incubar a 37 grados, 5% de CO₂ durante 3 a 4 horas. Luego, tome muestras de las células, cuente y realice la subclonación a 0,8–1,5 células/pozo en 200 l de medio.

注:使用本司"杂交瘤扩培及亚克隆专用培养基"培养后的亚克隆一般第6-8日即可开始下游检测筛选.

Nota: Los subclones cultivados con el medio de subclonación y expansión de células de hibridoma normalmente alcanzan una etapa adecuada para la detección o el análisis posterior en los días 6 a 8 después de la subclonación.