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Conjugado de péptido con proteínas portadoras (KLH, BSA y OVA)
Los péptidos cortos suelen ser demasiado pequeños para provocar una respuesta inmune suficiente. Por lo tanto, es necesario conjugar el péptido con una proteína portadora más grande para promover una respuesta inmune sólida y generar altos niveles de anticuerpos específicos. Biorunstar proporciona las siguientes proteínas transportadoras más utilizadas para conjugados peptídicos:
KLH (hemocianina de lapa californiana, PM 4,5 × 10⁵ - 1.3 × 10⁷ Da) es una proteína que contiene cobre-aislada deMegathura crenulatay generalmente es la proteína transportadora de primera-elección debido a su alta inmunogenicidad. Los péptidos conjugados con KLH suelen tener una solubilidad limitada en agua debido al tamaño y la estructura de la proteína; sin embargo, esto no afecta su inmunogenicidad y aún se pueden usar soluciones turbias para las inmunizaciones.
BSA (albúmina sérica bovina, PM 67 × 10³ Da) es una proteína transportadora popular para compuestos débilmente antigénicos debido a sus residuos de lisina accesibles. Al ser más pequeño, BSA es más soluble en agua-que KLH y se usa comúnmente en inmunoensayos. Sin embargo, dado que BSA se utiliza a menudo para bloquear la unión no específica, los conjugados de BSA no deben usarse para la inmunización si el sistema de ensayo usa BSA, ya que esto puede dar lugar a falsos positivos debido a los anticuerpos contra BSA en los antisueros.
OVA (ovoalbúmina, MW 45 × 10³ Da) es una proteína aislada de huevos de gallina. Se utiliza comúnmente como proteína transportadora de control para verificar que los anticuerpos sean específicos del péptido diana en lugar de la proteína transportadora (p. ej., KLH/BSA).

Generalmente, la elección de la química de conjugación depende de la secuencia peptídica del antígeno proporcionada.
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Secuencia contiene/ Sitio de reacción |
Química |
Comentarios |
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Gratis -grupo NH2 |
glutaraldehído |
①Recomiende NH2 libre de terminal N-, evite Lys o un terminal Pro N-en la secuencia interna si es posible ②La secuencia del péptido del antígeno proviene del C-terminal o región interna de la proteína. |
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-grupo COOH gratuito |
EDCI |
①Recomiende COOH sin terminal C-, evite Glu o Asp en la secuencia interna si es posible ②La secuencia del péptido del antígeno proviene de la región N-terminal o interna de la proteína. |
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-Grupo SH gratuito |
MBS/SMCC |
Enfoque comúnmente utilizado, generalmente mediante la adición de un Cys adicional a la secuencia en el extremo N- o C- |