Medio de selección y fusión de hibridomas (HAT) 杂交瘤细胞融合筛选培养基（HAT）

Descripción del producto

产品名称

Nombre del producto

杂交瘤细胞融合筛选培养基 (SOMBRERO)

Medio de selección y fusión de hibridomas (HAT)

货号 N.º cat.

BRS-MED01

规格

Especificación

500ml/瓶

500 ml/botella

产品组分

Componentes

DMEM 基础培养基:80%(体积比)

Medio base DMEM: 80% (v/v)

进口胎牛血清:10%(体积比)

Suero Fetal Bovino (SFB) Importado: 10% (v/v)

条件培养基:10%(体积比)

Medio condicionado: 10% (v/v)

Cantidad: 100 µ/mL

Penicilina: 100 U/mL

Contenido: 100 µ/mL

Estreptomicina: 100 U/mL

次黄嘌呤(hipoxantina):100uM

Hipoxantina: 100 µM

胸腺嘧啶核苷(timidina):16uM

Timidina: 16 µM

氨基蝶呤(Aminopterina):0.4uM

Aminopterina: 0,4 µM

其它添加物:多种细胞因子(足量)及添加剂

Otros aditivos: varias citoquinas (cantidad suficiente) y suplementos

保存条件

Condiciones de almacenamiento

-20 grados 保存,有效期 18 个月.

Almacenar a -20 grados. Vida útil: 18 meses.

使用方法

Instrucciones de uso

培养基融化:

37 grados 水浴融化本培养基,乙醇消毒外表面后置超净台备用;

Duración: 本品融化后出现少量白色絮状物属正常现象,静置 3-5min使其沉至瓶底,然后吸取上清使用即可.

Descongelar el medio:

Descongele el medio en un baño de agua a 37 grados. Limpie la superficie exterior con etanol al 70% y colóquela en un gabinete de bioseguridad para su uso.
Nota: La aparición de una pequeña cantidad de material floculante blanco después de la descongelación es normal. Deje reposar el medio durante 3 a 5 minutos para que los flóculos se asienten en el fondo y luego recoja con cuidado el sobrenadante para su uso.

细胞融合与接种:

使用物理(电融合)或化学(常规PEG)的方法完成细胞融合,然后使用本培养基直接重悬融合细胞,以合适的密度(电融合推荐:1E4细胞/孔-2E4 细胞/孔;PEG 融合推荐:5E4 细胞/孔-1E5 细胞/孔)和体积 (推荐:200ul/孔)铺 96 孔板,置 37 grado 5% CO2 培养箱静置培养.

Fusión celular y siembra:

Realice la fusión celular mediante métodos físicos (electrofusión) o químicos (PEG convencional). Resuspender las células fusionadas directamente en este medio a una densidad y volumen adecuados:

Electrofusión: 1 × 10⁴ – 2 × 10⁴ células/pocillo

Fusión de PEG: 5 × 10⁴ – 1 × 10⁵ células/pocillo
Volumen recomendado: 200 µL/pocillo en una placa de 96 pocillos.
Incubar a 37 grados, 5% de CO₂ para cultivo.

培养液更换

融合后的第 4-8 日,根据细胞生长状态进行半换液或全换液培养;

Reemplazo medio:

En los días 4 a 8 después de la fusión-, realice una sustitución parcial o completa del medio según el estado de crecimiento de las células.

克隆筛选:

当孔中细胞克隆长至合适大小后进行融合孔阳筛检测;

Detección de clones:

Cuando los clones de células en los pocillos alcancen un tamaño adecuado, realice una detección de clones positivos.

注意事项

Precauciones

本产品有一定毒性,仅用于杂交瘤细胞的筛选及培养,不可用于 培养活体动物,诊断或治疗药物用.

Este producto es tóxico y está destinado únicamente a la selección y cultivo de células de hibridoma. No debe utilizarse para el cultivo de animales vivos, fines de diagnóstico o aplicaciones terapéuticas.

本产品适用于 HGPRT 筛选系统的杂交瘤细胞的筛选培养,不适用于 TK或其它选择系统的细胞培养.本品不能用于直接培养 HGPRT 缺陷细胞 (如 NS1, SP2/0 等).

Este producto es adecuado para la selección y cultivo de células de hibridoma utilizando el sistema de selección HGPRT. No es aplicable a TK u otros sistemas de selección. Este medio no se puede utilizar para el cultivo directo de células deficientes en HGPRT-(p. ej., NS1, SP2/0).

本产品为无菌溶液,pH 为 7.2~7.4,取用需在无菌条件下进行.

Este producto es una solución estéril con un pH de 7,2 a 7,4. Toda manipulación debe realizarse en condiciones asépticas.