En el campo de la investigación biológica, la línea celular TET - 213 se ha convertido en un modelo significativo para diversas investigaciones experimentales, particularmente en estudios relacionados con la neurociencia y la oncología. Como proveedor líder de células TET - 213, entendemos la importancia de elegir los reactivos de transfección apropiados para la entrega de genes eficientes en estas células. Esta publicación de blog tiene como objetivo explorar los reactivos de transfección que son adecuados para TET - 213 y proporcionar información sobre sus ventajas y limitaciones.
Comprensión de TET - 213 células
TET - 213 es una línea celular neuronal humana que se usa comúnmente en la investigación debido a su capacidad para diferenciarse en las células como las neuronas. Estas células se derivan de un tumor de neuroblastoma y retienen muchas características de las células progenitoras neuronales. Sus propiedades únicas los hacen valiosos para estudiar el desarrollo neuronal, la función y la patogénesis de las enfermedades neurológicas. La transfección de genes exógenos en células TET - 213 puede ayudar a los investigadores a comprender la función génica, los mecanismos reguladores y los efectos de proteínas específicas en los procesos celulares.
Consideraciones clave para la transfección en TET - 213 células
Antes de seleccionar un reactivo de transfección, se deben considerar varios factores. En primer lugar, la eficiencia de transfección es crucial. La transfección de alta eficiencia asegura que una gran proporción de las células tome el ADN o ARN exógeno, lo que permite una expresión robusta del gen objetivo. En segundo lugar, la viabilidad celular debe mantenerse después de la transfección. Algunos reactivos de transfección pueden ser tóxicos para las células, lo que lleva a la muerte celular o un comportamiento celular anormal. En tercer lugar, el tipo de ácido nucleico que se transfecta (ADN, ARN o oligonucleótidos) y su tamaño también puede influir en la elección del reactivo de transfección.
Reactivos de transfección adecuados para TET - 213 células
Reactivos de transfección basados en lípidos
Los reactivos de transfección basados en lípidos son uno de los tipos de agentes de transfección más utilizados. Funcionan formando liposomas que encapsulan el ácido nucleico y se fusionan con la membrana celular, permitiendo que el ácido nucleico ingrese a la célula. Lipofectamine 2000 es un reactivo de transfección basado en lípidos bien conocido que se ha utilizado ampliamente para transfectar células TET - 213. Ofrece alta eficiencia de transfección, toxicidad relativamente baja y es adecuada para transfectar tanto ADN como ARN.
El mecanismo de lipofectamina 2000 implica la formación de liposomas cargados positivamente que interactúan con el ácido nucleico cargado negativamente para formar lipoplexes. Estos lipoplexes son internalizados por las células a través de la endocitosis. Una vez dentro de la célula, el ácido nucleico se libera y puede transportarse al núcleo para la expresión génica.
Otro reactivo basado en lípidos, Lipofectamine 3000, también ha mostrado un buen rendimiento en la transfección de células TET - 213. Es una versión mejorada de Lipofectamine 2000, con una mayor eficiencia de transfección y una toxicidad reducida. Lipofectamine 3000 utiliza una formulación novedosa que permite una mejor interacción con la membrana celular y un suministro más eficiente de ácidos nucleicos.
Reactivos de transfección basados en polímeros
Los reactivos de transfección basados en polímeros son otra opción para transfectar células TET - 213. La polietilenimina (PEI) es un reactivo a base de polímero comúnmente utilizado. PEI es un polímero catiónico que puede condensar los ácidos nucleicos en pequeñas partículas y promover su absorción por las células. Se ha informado que alcanza una alta eficiencia de transfección en células TET - 213, especialmente para la transfección de ADN. La ventaja de PEI es su bajo costo y facilidad de uso. Sin embargo, puede ser tóxico para las células a altas concentraciones, por lo que se requiere una optimización cuidadosa de las condiciones de transfección.
JETPEI es un reactivo de transfección basado en polímeros comerciales que ha sido diseñado para minimizar la toxicidad al tiempo que mantiene una alta eficiencia de transfección. Se ha utilizado con éxito en la transfección de células TET - 213, proporcionando un buen equilibrio entre la eficiencia de la transfección y la viabilidad celular.
Vectores de transfección basados en virales
Los vectores basados en virales también se usan ampliamente para la administración de genes en células TET - 213. Los vectores de adenovirus son conocidos por su alta eficiencia de transfección y su capacidad para infectar células divisorias y no divididas. Pueden transportar cantidades relativamente grandes de ADN exógeno y proporcionar una expresión génica fuerte y sostenida. Sin embargo, la producción de vectores de adenovirus es más compleja y consumo de tiempo en comparación con los reactivos de transfección no virales.
Los vectores de lentivirus son otra opción. Pueden integrar el ADN exógeno en el genoma de la célula huésped, lo que resulta en una expresión génica estable. Los vectores de lentivirus son adecuados para estudios a largo plazo en células TET - 213, como la generación de líneas celulares estables. Sin embargo, también requieren un manejo especial debido a sus potenciales riesgos biohazardos.
Comparación de reactivos de transfección para TET - 213 células
Al comparar diferentes reactivos de transfección, es importante considerar su rendimiento en términos de eficiencia de transfección, viabilidad celular, facilidad de uso y costo. Los reactivos basados en lípidos como Lipofectamine 2000 y 3000 son relativamente fáciles de usar y tienen una alta eficiencia de transfección con la viabilidad celular aceptable. Son adecuados para experimentos a corto plazo y a largo plazo. Los reactivos basados en polímeros como PEI y JETPEI son costosos, efectivos y pueden lograr una buena eficiencia de transfección, pero se necesita optimización de toxicidad. Los vectores basados en virales ofrecen entrega de genes de alta eficiencia y expresión estable, pero requieren equipos más especializados y precauciones de seguridad.
Aplicaciones de TET transfectadas - 213 células
Una vez transfectado con éxito, las células TET - 213 se pueden usar en una variedad de aplicaciones. Por ejemplo, en los estudios de función génica, las células transfectadas pueden usarse para investigar el papel de genes específicos en el desarrollo y la función neuronales. Al sobreexpresar o derribar un gen particular, los investigadores pueden observar los cambios en la morfología celular, la liberación de neurotransmisores y las vías de transducción de señales.
En el descubrimiento de fármacos, las células TET - 213 transfectadas se pueden usar como modelo de detección para identificar posibles agentes terapéuticos. Por ejemplo, los genes asociados con enfermedades neurológicas pueden transfectarse a las células, y luego las células pueden tratarse con diferentes compuestos para evaluar sus efectos sobre los fenotipos relacionados con la enfermedad.
Además, las células TET - 213 transfectadas con genes que codifican proteínas fluorescentes pueden usarse para estudios de imágenes de células vivas. Esto permite a los investigadores observar procesos celulares dinámicos en tiempo real.
Péptidos relacionados para experimentos asociados
En algunos experimentos que involucran TET - 213 células transfectadas, se pueden usar péptidos adicionales. Por ejemplo,Cyclo (Radfk),Sustancia P (9 - 11), yBeta - amiloide (1 - 40), humanopuede usarse en estudios relacionados con la señalización neuronal, las interacciones péptidos -receptores y las enfermedades neurodegenerativas. Estos péptidos pueden ayudar a dilucidar aún más los mecanismos subyacentes a la función neuronal y al desarrollo de la enfermedad.
Conclusión
Elegir el reactivo de transfección apropiado para las células TET - 213 es crucial para el suministro de genes exitoso y los estudios experimentales posteriores. Los reactivos de transfección basados en lípidos, basados en polímeros y basados en virales tienen sus propias ventajas y limitaciones. Los investigadores deben considerar cuidadosamente los requisitos específicos de sus experimentos, como la eficiencia de la transfección, la viabilidad celular y el tipo de ácido nucleico que se está transfectando, al seleccionar un reactivo de transfección.
Como proveedor de células TET - 213, estamos comprometidos a proporcionar células de alta calidad y ofrecer orientación sobre las mejores prácticas para el cultivo celular y la transfección. Si está interesado en comprar TET - 213 células para su investigación o tener preguntas sobre reactivos de transfección y experimentos relacionados, no dude en contactarnos para obtener más información y discutir posibles oportunidades de colaboración.
Referencias
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- Chen, C. y Okayama, H. (1987). Transformación de alta eficiencia de células de mamíferos por ADN plasmídico. Biología molecular y celular, 7 (8), 2745 - 2752.
- Amara, F., Rehem, A. y Galy, A. (2016). Una revisión de los métodos de transfección actuales y los sistemas de entrega. Journal of Pharmacy & Bioallied Sciences, 8 (3), 181 - 187.