Los ingredientes farmacéuticos activos de péptidos (API) han ganado una atención significativa en la industria farmacéutica debido a su alta especificidad, baja toxicidad y potencial para tratar una amplia gama de enfermedades. Como proveedor líder de API de péptidos, estamos comprometidos a proporcionar productos de péptidos de alta calidad a través de métodos de síntesis avanzados. En este blog, profundizaremos en las diversas formas en que se sintetizan las API de péptidos.
Síntesis de péptidos de fase sólida (SPP)
La síntesis de péptidos de fase sólida es uno de los métodos más utilizados para sintetizar API de péptidos. Este enfoque fue pionero por Robert Bruce Merrifield en 1963, que revolucionó la síntesis de péptidos y le valió el Premio Nobel de Química en 1984.
El principio básico de las SPP implica unir el terminal C del primer aminoácido a un soporte sólido insoluble, como una resina. Esta resina proporciona una plataforma estable para reacciones químicas posteriores. El grupo amino del aminoácido unido está protegido con un grupo de protección adecuado, típicamente fmoc (9 - fluorenilmetiloxicarbonilo) o boc (terc - butiloxicarbonilo).
Una vez que el primer aminoácido está unido a la resina, se elimina el grupo de protección en su grupo amino, exponiendo el grupo amino reactivo. El siguiente aminoácido, también con su grupo amino protegido, se acopla al grupo amino libre del aminoácido previamente unido utilizando un reactivo de acoplamiento. Commonly used coupling reagents include DIC (N,N' - diisopropylcarbodiimide), HBTU (O - benzotriazole - N,N,N',N' - tetramethyl - uronium - hexafluoro - phosphate), and HATU (O - (7 - azabenzotriazol - 1 - yl) - N,N,N',N' - tetrametiluronio hexafluorofosfato).
Después de cada paso de acoplamiento, los grupos amino sin reaccionar están limitados para evitar la formación de secuencias de deleción. Esto generalmente se hace usando anhídrido acético. El ciclo de desprotección, acoplamiento y limitación se repite para cada aminoácido en la secuencia de péptidos deseada.
Una vez que toda la secuencia del péptido se ha ensamblado en la resina, el péptido se escinde de la resina usando un cóctel de escisión. Este cóctel también elimina cualquier grupo de protección de cadena lateral que estuviera presente en los aminoácidos durante la síntesis. El péptido escindido se purifica por métodos como la cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC).
Solución - Síntesis de péptidos de fase
Solución: la síntesis de péptidos de fase es un método más antiguo, pero aún tiene sus ventajas en ciertas situaciones. En este método, todas las reacciones tienen lugar en solución, y el péptido no está unido a un soporte sólido.
La síntesis comienza con la protección de los grupos amino y carboxilo de los aminoácidos individuales. Similar a los SPP, se utilizan grupos de protección como FMOC o BOC para el grupo amino, y los grupos de éster se utilizan para proteger el grupo carboxilo.
El primer paso es el acoplamiento de dos aminoácidos protegidos para formar un dipéptido. Esto se logra utilizando un reactivo de acoplamiento, similar a los utilizados en SPP. Después de la formación del dipéptido, se eliminan los grupos de protección en un extremo del dipéptido, y luego se combina con otro aminoácido o dipéptido protegido para formar un péptido más largo.
El proceso se repite, paso, hasta que se obtenga la secuencia de péptidos deseada. Uno de los desafíos de la síntesis de la solución de la solución es la purificación de los péptidos intermedios en cada paso, ya que la mezcla de reacción contiene varios productos y materiales de partida sin reaccionar. La purificación se lleva a cabo típicamente por extracción, cristalización o cromatografía.
Ligadura química
La ligadura química es un método poderoso para sintetizar péptidos o proteínas grandes que son difíciles de ensamblar utilizando SPP tradicionales o síntesis de fase de solución tradicionales. Uno de los métodos de ligadura química más bien conocidos es la ligadura química nativa (NCL).
En NCL, un péptido con un tioester terminal C reacciona con otro péptido con un residuo de cisteína N -terminal. La reacción ocurre en condiciones acuosas leves y da como resultado la formación de un enlace péptido nativo entre los dos péptidos.
El proceso implica primero sintetizar dos o más segmentos de péptidos usando SPP o síntesis de fase de solución. Un segmento se prepara con un tioester terminal C y el otro con una cisteína N - Terminal. Estos segmentos se mezclan en un tampón adecuado, y la reacción de ligadura tiene lugar. Después de la ligadura, si es necesario, el residuo de cisteína puede modificarse o usarse aún más como manejo para reacciones químicas adicionales.
Síntesis convergente
La síntesis convergente es una estrategia que combina las ventajas tanto de SPP como de ligadura química. En lugar de sintetizar toda la secuencia de péptidos de manera lineal, el péptido se divide en segmentos más pequeños, que se sintetizan por separado usando SPPS.
Estos segmentos se ligan juntos utilizando métodos de ligadura química. Este enfoque reduce el número de pasos de acoplamiento requeridos para la síntesis de péptidos grandes, lo que puede mejorar el rendimiento general y la pureza del producto final. Por ejemplo, un péptido largo se puede dividir en tres o cuatro segmentos, cada uno con 10 a 20 aminoácidos. Estos segmentos se sintetizan en la resina, se escinden y luego se ligan de manera convergente.
Ejemplos de nuestras API de péptidos
Ofrecemos una amplia gama de API de péptidos, incluidasC20 - OTB - Glu (OBBU) - ATBI10 - ATBU) FOTOS - O OIE - OANA - OE,C20 (OTBU) - Glu (OTBU), yPalmitoil - Glu (OSU) - OTBU. Estos péptidos se sintetizan utilizando los métodos avanzados descritos anteriormente, asegurando una alta pureza y calidad.
Control de calidad en la síntesis de API de péptidos
El control de calidad es de suma importancia en la síntesis de las API de péptidos. Tenemos un sistema integral de control de calidad para garantizar que nuestros productos cumplan con los más altos estándares.
Después de la síntesis, el péptido se analiza mediante varias técnicas, incluidas HPLC, espectrometría de masas (MS) y resonancia magnética nuclear (RMN). El HPLC se usa para determinar la pureza del péptido, mientras que MS se usa para confirmar el peso molecular del péptido. La RMN puede proporcionar información sobre la estructura y la conformación del péptido.
También realizamos estudios de estabilidad para garantizar que las API de los péptidos permanezcan estables en diferentes condiciones de almacenamiento. Esto incluye probar el péptido a diferentes temperaturas, valores de pH y en presencia de varios excipientes.
Conclusión
La síntesis de las API de péptidos es un proceso complejo y múltiple que requiere técnicas avanzadas y un estricto control de calidad. Como proveedor de API de péptidos, estamos explorando constantemente nuevos métodos y tecnologías para mejorar la eficiencia y la calidad de nuestra síntesis. Ya sea a través de la síntesis de péptidos de fase sólida, la síntesis de fase de solución, la ligadura química o la síntesis convergente, estamos comprometidos a proporcionar a nuestros clientes productos de péptidos de alta calidad.
Si está interesado en comprar nuestras API de péptidos o tiene alguna pregunta sobre la síntesis de péptidos, no dude en contactarnos para discusiones de adquisiciones. Esperamos trabajar con usted para satisfacer sus necesidades de API de péptidos.
Referencias
- Fields, GB y Noble, RL (1990). Síntesis de péptidos de fase sólida utilizando 9 aminoácidos de fluorenilmetoxicarbonilo. Revista Internacional de Investigación de Péptidos y Proteínas, 35 (2), 161 - 214.
- Dawson, PE, Muir, TW, Clark - Lewis, I. y Kent, SBH (1994). Síntesis de proteínas por ligadura química nativa. Science, 266 (5186), 776 - 779.
- Chan, WC y White, PD (2000). Síntesis de péptidos de fase sólida FMOC: un enfoque práctico. Oxford University Press.